Mitä ELISA-sarjat käyttävät
Jun 25, 2019
ELISA perustuu antigeenien tai vasta-aineiden ja antigeenien tai vasta-aineiden entsyymimarkkerien kiinteytymiseen. Kiinteän -faasin kantajan pintaan sitoutuneet antigeenit tai vasta-aineet säilyttävät edelleen immunologisen aktiivisuutensa, ja entsyymi-leimatut antigeenit tai vasta-aineet säilyttävät sekä immunologisen aktiivisuutensa että entsyymiaktiivisuutensa. Määrityksen aikana tutkittava näyte (siellä oleva vasta-aine tai antigeeni) reagoi kiinteän -faasin kantajan pinnalla olevan antigeenin tai vasta-aineen kanssa. Kiinteän -faasin kantajalle muodostunut antigeenivasta-ainekompleksi erotetaan muista nesteen aineista pesumenetelmällä. Antigeeni tai vasta-aine, johon sitten lisätään entsyymimarkkereita, yhdistetään myös kiinteäfaasivektorissa reaktiolla. Tällä hetkellä entsyymin määrä kiinteässä faasissa on verrannollinen tutkittavan aineen määrään näytteessä. Entsyymireaktion substraatin lisäämisen jälkeen entsyymi katalysoi substraattia värillisenä tuotteena, tuotteen määrä on suoraan verrannollinen tutkittavan aineen määrään näytteessä, joten se voi olla kvalitatiivinen tai kvantitatiivinen analyysi värisyvyyden mukaan. Entsyymin korkean katalyyttisen tehokkuuden vuoksi immuunivasteen tulokset suurentuvat epäsuorasti, mikä tekee mittausmenetelmästä erittäin herkän.
ELISA:ta voidaan käyttää antigeenien ja vasta-aineiden määrittämiseen. Elisa-kokeilun tuloksiin vaikuttaa kuitenkin monia tekijöitä, joten kunkin linkin laadunvarmistuksen vahvistaminen voi antaa täyden pelin sen metodologisille eduille.